Como evitar mal-entendidos comuns no uso de dicas de pipeta de baixa ligação?

Dicas de pipeta de ligação baixa pode reduzir significativamente os resíduos da amostra devido ao seu projeto de superfície interna hidrofóbica e são particularmente adequados para lidar com reagentes caros, líquidos viscosos ou amostras de rastreamento (como proteínas e ácidos nucleicos). No entanto, se não forem operados corretamente, ainda poderão afetar a precisão e a repetibilidade do experimento. A seguir, é apresentada uma análise de erros e soluções comuns em uso em combinação com as especificações operacionais de laboratório:

Mal-entendimento 1: Ignorando a pré-enrolamento da ponta

Operação errada: aspiram diretamente na amostra e omitem a etapa de pré-enrolamento.

Impacto: Embora as pontas de pipeta de baixa ligação possam reduzir os resíduos, para amostras como soro, proteína ou solventes orgânicos, suas paredes internas ainda podem formar um filme micro-líquido devido à tensão superficial, resultando em um baixo volume inicial de pipetagem.

Abordagem correta: Antes da pipetagem formal, repita a descarga de aspiração 2 a 3 vezes com a mesma amostra para formar uma camada estável de filme líquido na parede interna da ponta (exceto para líquidos de alta temperatura/baixa temperatura).

Mal -entendimento 2: A velocidade de aspiração é muito rápida ou o ângulo é inclinado

Operação errada: Aspire o líquido rapidamente ou a pipeta é inclinada mais de 20 °.
Impacto:

Pipeta muito rápida: bolhas ou sucção nas costas (líquido corre para a pipeta e contamina o pistão);
Pipeta inclinada: altera a pressão da superfície líquida, resultando em volume impreciso de pipetagem e aumento do volume residual. Abordagem correta:
Pipete lentamente e solte lentamente: opere a uma velocidade constante e controle a velocidade de liberação do pistão;
Segure verticalmente: mantenha o ângulo de inclinação ≤20 ° quando a ponta da pipeta estiver imersa na superfície líquida.
Mal -entendimento 3: Ignorando as diferenças operacionais de líquidos viscosos
Operação errada: use a mesma velocidade de pipeta que líquidos comuns para amostras de alta viscosidade (como suspensões de glicerol e células).
Impacto: Os líquidos viscosos fluem lentamente na parede interna da ponta da pipeta, e a descarga rápida causará um aumento significativo no volume residual, compensando as vantagens do projeto de baixa adsorção.
Abordagem correta:

Estenda o tempo de imersão: fique na superfície do líquido por 1 segundo depois de aspirar antes de removê -lo e faça uma pausa por 1 segundo antes de pressionar a segunda marcha a soprar o líquido ao descarregar;
Escolha uma ponta de pipeta de boca larga: para macromoléculas ou amostras de células, use uma ponta de pipeta de baixa adsorção de boca larga (70% maior que a abertura padrão) para reduzir a força de cisalhamento.
Equívoco 4: Batendo com força ao instalar a ponta
Operação errada: atingindo repetidamente a alça da pipeta para "apertar" a ponta.
Efeito: O impacto a longo prazo usará os componentes de vedação de pipeta, destruirá a estação aérea e causará erro de vazamento ou volume.
Método correto: Insira a pipeta na vertical na ponta, pressione levemente e gire ligeiramente para a esquerda e para a direita para caber.

Equívoco 5: armazenamento ou reutilização incorreta
Operação errada:

Coloque a pipeta plana quando houver líquido residual na ponta;
Reutilizar dicas descartáveis ​​de baixa adsorção para economizar custos. Impacto:
Colocar a planície faz com que o refluxo de líquido corronha a mola do pistão;
A reutilização pode afetar a precisão devido à contaminação cruzada ou deformação estrutural. Método correto:
Descarte a ponta imediatamente após a pipeta e pendure a pipeta verticalmente;
A reutilização é estritamente proibida, especialmente quando se trata de experimentos sensíveis, como PCR e isótopos.
Aconselhamento profissional: maximizar as vantagens das dicas de baixa retenção
Combine as propriedades dos líquidos:
Líquidos voláteis (como clorofórmio): evite usar dicas comuns de baixa retenção e usar pontas seguras de solvente ou pipetas de pistão externo projetadas para reagentes voláteis.
Verificação de calibração:
Pese regularmente o peso da água pura com um equilíbrio analítico (1ml = 0,9982g a 20 ℃) ​​para verificar se o volume real atende ao padrão.
Resumo dos pontos-chave: as dicas de baixa retenção melhoram a precisão, reduzindo a perda de amostra, mas se os detalhes da operação forem ignorados, ela ainda poderá ser contraproducente. Instalação padronizada, controle de velocidade, adaptação às características da amostra e uso único rigoroso são a base para alcançar experimentos de alta repetibilidade.